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METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE

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Fundamento:



La concentración de huevos, larvas y
quistes en heces ha llegado a ser un procedimiento de rutina como parte de un
examen completo para la detección de los parásitos intestinales y se puede
realizar como complemento del examen directo.

Los procedimientos de
concentración permiten la detección de protozoos y/o helmintos empleándose dos
métodos: de sedimentación y flotación, o una combinación de ambos, para separar
los protozoos y los huevos de helmintos de las heces, utilizando las diferencias en el peso específico.

Se deben emplear cuando la cantidad
de muestra fuera pequeña, en un control de tratamiento o cuando se deba
transportar poca cantidad de muestra a un lugar distante.



Concentración por Sedimentación



Los parásitos se concentran por acción de la gravedad, suspendiendo las heces
en agua corriente, agua destilada o solución salina y dejando que sedimenten
naturalmente o por centrifugación. Estos métodos son principalmente útiles para
la concentración de quistes, o quistes y huevos.



Ventajas: es fácil de
realizar, no requiere observación microscópica inmediata y se puede aplicar a
la concentración de la mayoría de los parásitos intestinales.



Desventajas: la observación
microscópica puede dificultarse por concentración de elementos

No parasitarios.



Existen varios métodos de sedimentación:



a) Sedimentación espontánea: método de sedimentación sencilla método de
sedimentación simple de Lumbreras método de Baermann- Moraes

b) Sedimentación por centrifugación: método de Charles- Batherlemy método de
formol-éter o Ritchie método de Acetato de Etilo (macro y micro técnica)





Se
basa en la concentración mediante la centrifugación, con ayuda de formol y éter
para separar y visualizar los elementos parasitarios.



Unas
ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas
parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de material fecal
procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para
evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.



Material
Y EQUIPO:



Centrifuga                                         



Tubos
de Ensaye cónicos de 15 ml.                                                    
Soluc. Salina isotónica



Gasa cortada en cuadros                                                                      
Soluc. De formaldehido al 100%



Embudos de polietileno                                                                          éter          



Vasos
de precipitado de 50ml



Aplicadores de madera



Pipetas
Pasteur con bulbo



Portaobjetos
de 26x76mm



Cubreobjetos
de 22x22mm



Microscopio



METODO



Con
el aplicador de madera se coloca aproximadamente1gr. De la materia fecal en el
vaso de precipitado, se añade 10ml de solución salina y se homogeniza.  Nuestra muestra biológica tenía un olor
fétido, de color café claro, no tenía ninguna anomalía, parecía de una persona
sana.



Se filtra la
suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtro en
el tubo cónico. Se puede poner  los tubos
de las dos muestras iguales para después



Se centrifuga la
suspensión durante 2 minutos a 2000 rpm.



Se decanta al
sobrenadante y resuspende el sedimento con solución salina centrifugando,
decantando y resuspendiendo 2 veces más. Para esto nosotros debemos tener mucho
cuidado con la tapa del tubo cónico, porque puede botaren la centrifuga y se
extiende todo en contenido.



Al último sedimento
se le agrega 10ml de solución de formaldehidos al 10% se mezcla y se deja
reposar durante 10min.



Se añade después
5ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente
durante 30 segundos.



Se centrifuga
durante 2 minutos a 2000rmp.



Después de
centrifugarse observan 4 capas:



a) Éter en la
superficial



b) Un tapón de
restos fecales



c) Formaldehido



d) Sedimentos en el
fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.   Parece un arcoíris muy bonito.                  



Se decanta el
sobrenadante



Se induce la pipeta
Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota de sedimento y se
coloca en un portaobjetos.



Se le añade una
gota de Lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza,
cubriéndolo con el mismo.



Se observa la
preparación en el mismo microscopio con objetivo de 10x y 40x.



OBSERVACIONES



 



Se observo en esta muestra con el
objetivo  general no se encontraron nada
interesante.



OBJETIVO  10%



Se observaron  pedazos DE COMIDA PERO NADA DE IMPORTANCIA,
ALGUNAS GRASAS, CRISTALES DE ACIDO, ALGUNAS FIBRAS MUSCULARES.







OBJETIVO40%



Pues
solo se logro confirmar que eran grasas.



CONCLUSIÓN



Se
concluyo que esta práctica tuvo el fin de aprender y observar material fecal
microscópico y dar a conocer que es lo que a vía en las heces de los pacientes
de heces.



Esta
práctica se vasa en  la propiedad de la
densidad de los huevecillos de los protozoos en la muestra, recolectada y
destruida.



Se
funciona con la técnica de faust para matar y colorearlos e identificarlos, es
como el completo de esta técnica para poder dar resultados mas exactos.

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Comentarios METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE

 Muy  Excelente experiencia, Cuando el usuario esta paracitado esta tecnica es muy efectiva, para la detección de quistes y huevecillos.

                   Muchas Gracias

Wilson Barrientos Wilson Barrientos 27/02/2012 a las 17:39
Disculpe, cual es la bibliografía de este método?
Irama Irama 13/10/2013 a las 22:03

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